猪胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立及临床应用

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zddlcp05030613

【摘要】

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为建立直接检测可疑病料中胸膜肺炎放线杆菌（APP）的PCR诊断方法，对用以扩增apxⅣA毒力基因3’端长约442bp的核苷酸片段的引物、模板、Taq DNA聚合酶、dNTPs的最适剂量及退火温度

【作者】

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冼琼珍叶润全顾万军王淑敏黄良宗

【机构】

：

佛山科学技术学院生命科学学院

【出处】

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中国兽医科学

【发表日期】

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2007年2期

【关键词】

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猪胸膜肺炎放线杆菌 PCR 临床应用

【基金项目】

：

广东省自然科学基金项目(034064);佛山市科技发展专项基金项目(03020031)

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为建立直接检测可疑病料中胸膜肺炎放线杆菌（APP）的PCR诊断方法，对用以扩增apxⅣA毒力基因3’端长约442bp的核苷酸片段的引物、模板、Taq DNA聚合酶、dNTPs的最适剂量及退火温度进行了优化筛选，并进行了特异性及重复性试验；以筛选出的优化条件，对临床可疑病料进行了PCR检测。结果，在25μL体系中，以5pmol／μL引物、0．25μL Taq DNA聚合酶、2mmol／L dNTPs、56℃退火温度对APP标准菌株apxⅣA毒力基因的扩增效果最好，重复性和稳定性高；而对类症菌株的扩增结果则为

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