【摘 要】
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目的探寻一种简单、有效的人脐静脉内皮细胞体外培养方法,为心脑血管疾病研究提供细胞模型。方法 0.1%II型胶原酶和0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA(1∶1)灌注分离人脐静脉内皮细胞,细
【机 构】
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宁夏医科大学,宁夏医科大学总医院附属心脑血管病医院神经内科
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目的探寻一种简单、有效的人脐静脉内皮细胞体外培养方法,为心脑血管疾病研究提供细胞模型。方法 0.1%II型胶原酶和0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA(1∶1)灌注分离人脐静脉内皮细胞,细胞置于DMEM培养基中,37℃、5%CO2培养箱内培养,倒置相差显微镜观察细胞生长情况,激光共聚焦显微镜鉴定Ⅷ因子相关抗原和透射电镜观察细胞超微结构。结果细胞分离0h时,混杂较多红细胞,24h后细胞呈球形、小多角形、椭圆形,呈簇状分布,3d后变成梭形单层铺路石状;共聚焦扫描见胞浆中Ⅷ因子相关抗原呈阳性;透射电镜可见胞浆内有Weibel-Palade小体。结论 0.1%胶原酶II和0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA混合消化液灌注是获得人脐静脉内皮细胞的一种可靠方法,细胞纯度高、活性好。
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