【摘 要】
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应用碱性抽提、亲和层析、凝胶过滤和离子交换层析等技术从草鱼垂体中分离提纯出纯度高的 草鱼生长激素(gcGH)。用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测表明草鱼GH与大马哈鱼GH抗血清 具有明显的免疫
【机 构】
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中国水产科学研究院长江水产研究所淡水鱼类种质资源与生物技术国家重点实验室!沙市434000; 中?;
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应用碱性抽提、亲和层析、凝胶过滤和离子交换层析等技术从草鱼垂体中分离提纯出纯度高的 草鱼生长激素(gcGH)。用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测表明草鱼GH与大马哈鱼GH抗血清 具有明显的免疫交叉反应,而与大马哈鱼催乳素(PRL)抗血清没有交叉反应,聚丙烯酰胺凝胶电 泳表明草鱼 GH为单一蛋白带,其分子量约为22500道尔顿;等电聚焦揭示出草鱼 GH主要由等电 点为4.7和5.0的两条蛋白带组成。用纯化的草鱼GH制备了其特异的兔抗血清。在ELISA测定中, 该抗血清与大马哈鱼GtH及牛GH完全没有交叉反应,而与大马哈鱼GH只有当其浓度高达2ug/ ml时,才有微弱的交叉反应.草鱼 GH抗血清的效价确定为1: 40000左右。应用草鱼 GH及其抗血清 建立了酶标受体测定法(ELISA-RA)并检测了草鱼GH的生物活性。结果表明,草鱼GH具有与草 鱼肝细胞GH受体特异结合的生物活性。免疫细胞化学研究表明草鱼GH抗血清只与草鱼垂体间 叶(PPD)的生长激素分泌细胞特异结合,而与前叶(RPD)及后叶(PI)细胞均无染色反应。
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