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目的
炎症性肠病是儿童和青少年时期重要的慢性胃肠道疾病,肠黏膜屏障的损伤在其发病中起重要作用。本研究通过IL-1β刺激Caco-2细胞单层,体外模拟炎症性肠上皮细胞屏障,为研究炎症性肠病的发病及治疗提供基础。
方法体外培养Caco-2细胞21 d模拟肠上皮细胞单层屏障。炎症1组从培养第5天开始每隔1天应用IL-1β处理2 h检测TEER值,至第21天。炎症2组于培养第18天换用含IL-1β培养液,分别于处理0、12、24、48、72 h检测TEER。正常对照组用普通培养液培养,也于相应时间点检测TEER。
结果正常对照组细胞TEER从第5天至第15天逐渐增加,在第15天达到600 Ω·cm2,并到达平台期保持至第21 d。炎症1组细胞TEER值均低于正常组细胞,并且直至第21天仍<500 Ω·cm2。炎症2组细胞显示时间依赖性的TEER逐渐降低,在48 h达到最大值,然后在72 h轻度回升。
结论培养2~3周的Caco-2细胞能够形成具有极性的肠上皮细胞单层,对其给予IL-1β刺激可在体外模拟炎症性肠上皮细胞屏障。