【摘 要】
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目的建立产生带有gfp报道基因的重组EB病毒株. 方法构建一个有EBV DNA BamHⅠ的C和H片段、gfp报道基因和puromycin选择基因的真核细胞穿梭质粒(pGFPUROEB);采用电穿孔法将其
【机 构】
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湛江,Department of Molecular Biology
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目的建立产生带有gfp报道基因的重组EB病毒株. 方法构建一个有EBV DNA BamHⅠ的C和H片段、gfp报道基因和puromycin选择基因的真核细胞穿梭质粒(pGFPUROEB);采用电穿孔法将其转染于B95-8细胞中,并用荧光显微镜和流式细胞仪检测gfp的表达,PCR及Southern blot检测重组gfp EB病毒基因. 结果经puromycin的长期筛选,建立80%以上表达gfp的B95-8细胞株(称gfpB95-8),PCR检测有gfp基因;经Southern blot检测证实gfpB95-8可产生重组gfp的EB病毒. 结论构建了gfp报道基因和puromycin选择基因的真核细胞穿梭质粒;并成功建立产生带有gfp报道基因的重组EB病毒株.
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