【摘 要】
：
利用基因重组方法构建齐口裂腹鱼PGC-1α超表达和干扰慢病毒载体,为最终阐明PGC-1α调控齐口裂腹鱼肌纤维类型转化的分子机理提供重要基础。根据GenBank上登录的齐口裂腹鱼PG
【基金项目】
：
国家自然科学基金资助项目(31201990);四川省应用基础研究项目(2014JY0088)
论文部分内容阅读
利用基因重组方法构建齐口裂腹鱼PGC-1α超表达和干扰慢病毒载体,为最终阐明PGC-1α调控齐口裂腹鱼肌纤维类型转化的分子机理提供重要基础。根据GenBank上登录的齐口裂腹鱼PGC-1α基因序列(GenBank登录号为JN195738)设计引物,经过PCR扩增、双酶切、连接来构建PGC-1α超表达和干扰的慢病毒核心质粒,然后将其与穿梭质粒及包装质粒共同转染293T细胞包装成病毒颗粒,感染体外培养的C2C12成肌细胞,利用实时荧光定量PCR(qPCR)检测PGC-1α在被超表达和干扰表达慢病毒载体感染C2C12成肌细胞72h后的表达水平,确定其超表达及干扰效果。重组质粒FUGWPGC-1α-RFP及PsicoR-PGC-1α-GFP测序验证成功,包装后感染C2C12成肌细胞经qPCR检测后结果显示,超表达组PGC-1α基因表达水平极显著高于对照组(P<0.01),而转染shRNA1组及shRNA2组的PGC-1α基因表达水平极显著低于对照组(P<0.01),证明该基因被成功超表达和干扰。成功构建齐口裂腹鱼PGC-1α超表达及干扰慢病毒载体,为进一步研究该基因在成肌细胞分化中的作用提供重要的基础数据。
其他文献
目的 探索控制以钩虫为主的土源性线虫病最佳的防治方案。方法选一个村为实施试点，通过健康教育，全民粪检，环境土壤分离，首年冬季２次和第二、三年每年１次的全民服药驱虫，并于治毕半
该文针对教学中存在的一些误解,对验电器和静电计两种实验仪器的结构和用途等方面的差异作了必要的辨析。
在山西省蚕业科学研究院基地对五个桑品种生物学性状、生育期、产叶量及其叶质进行调查分析,发现鲁插2号综合表现较好,8826、9312品种表现次之,蒲选1号、鸡桑变品种表现较差
2008年,国内运营商完成重组,形成电信、移动、联通三大运营商。随着国内市场环境逐渐成熟,三大运营商的通信业务和产品营销模式日益趋同,竞争压力越来越大,高新增客户率已经
<正>作为江苏省"十二五"规划课题《幼儿园语言教学情趣化实践研究》的子课题主持人,我一直在思考:要让幼儿园的语言教学活动更加生动有趣,首先应该寻找出适合各年龄段幼儿的
对上市公司是否利用2007年新实施的债务重组准则进行盈余管理进行了研究,检验结果表明,债务重组公司利用了新债务重组准则实施盈余管理;其中主要是亏损公司和ST公司为了达到
我国村民自治在实践中面临着一系列来自体制内外的困难和问题。总结并分析了这些问题产生的原因,同时对如何进一步推进村民自治,完善农村基层民主政治建设进行了简要的探索,
利用超声波提取芹菜中槲皮素,采用正交试验L16(45)对芹菜槲皮素成分提取工艺进行优化设计。结果表明,芹菜槲皮素提取工艺的最佳条件为:浸泡4 h,超声波功率320 W,乙醇浓度90%,
端粒位于真核细胞染色体末端,是细胞维持染色体稳定的重要成分,端粒长度会随染色体的不完全复制而逐渐缩短。过短的端粒无法维持基因组的稳定性,最终导致细胞老化、机体衰老