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目的利用CRISPR/Cas9技术建立肠癌抑制基因Mindin的稳定敲除细胞株。方法针对Mindin基因编码序列设计三个向导RNA(sgRNA),将表达sgRNA和Cas9蛋白的质粒共同电转进小鼠成纤维细胞L929中,加入药物筛选获得细胞库。测序检测细胞库基因组的突变效率,并从高突变细胞库中挑取单克隆进一步培养与鉴定。结果三个sgRNA都能介导CRSIPR/Cas9高效编辑Mindin基因靶位点,从中挑选得到Mindin基因缺失并可稳定遗传的L929细胞株。结论我们得到了一个稳定敲除Mindin基因的L929细胞株,为后续研究Mindin基因在肠癌发生与发展过程中的作用提供了必要的研究素材,为其动物模型的建立打下坚实的基础。