库普弗细胞条件培养基对原代培养肝细胞的细胞毒性

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目的探讨内毒素血症时库普弗细胞激活对肝细胞损伤的作用机制。方法用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流,Percoll密度梯度离心分离、纯化SD大鼠肝细胞和库普弗细胞,制备内毒素(LPS)刺激的库普弗细胞的条件培养基(KCCM)并作用于肝细胞,检测肝细胞培养基丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量,四甲基偶氮唑蓝(M1T)法检测KCCM对大鼠原代肝细胞活性的影响。结果KCCM作用于肝细胞2h后,肝细胞培养基中ALT、AST及LDH含量均明显升高(P〈0.05),在2~4h内随时
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