【摘 要】
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为研究猪Viperin蛋白在猪体内的抗病毒活性,用IFN-α刺激PK-15细胞24h,收集细胞提取RNA后,采用RT-PCR方法扩增猪Viperin基因,并连接至pEASY-bluntsimple平末端连接测序载体,P
【机 构】
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河南省农业科学院畜牧兽医研究所,南京农业大学动物医学院,普莱柯生物工程股份有限公司
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31672565),河南省农业科学院优秀青年科技基金(2018YQ21)
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为研究猪Viperin蛋白在猪体内的抗病毒活性,用IFN-α刺激PK-15细胞24h,收集细胞提取RNA后,采用RT-PCR方法扩增猪Viperin基因,并连接至pEASY-bluntsimple平末端连接测序载体,PCR鉴定后送公司测序正确。采用DNAStar分析猪Viperin蛋白的免疫原性和疏水性,选取抗原性较好的一段基因,采用PCR扩增后,插入pET-28a+大肠杆菌表达载体,在37℃条件下用IPTG诱导含有重组质粒的大肠杆菌BL21,SDS-PAGE分析证明,Viperin重组蛋白以包涵体的形式
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