克隆大鼠内皮素B受体基因重组腺病毒穿梭质粒的构建及鉴定

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目的克隆大鼠内皮素B受体(EDNRB)基因,构建含有EDNRB基因的重组腺病毒载体,为转染神经干细胞和基因治疗先天性巨结肠(HD)奠定基础。方法从大鼠心脏组织中提取总RNA,用RT—PCR方法扩增出约1580bp的片段,并将该片段克隆到载体pAdtrack—CMV中,进行酶切鉴定和序列分析。结果证实成功构建了含有EDNPd3基因的重组腺病毒质粒。结论克隆到正确的大鼠EDNPd3基因,并构建出重组质粒pAd—EDNRB,为下一步重组腺病毒颗粒和基因治疗打下基础。
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