【摘 要】
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建立稳定高效的动物细胞表达系统对于许多重组蛋白质药物的工业化生产有着十分重大的意义.用PCR扩增得到dhfr基因,克隆入载体pIRESneo3基因以替换原有的neor基因,并将hbFGF作
【机 构】
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广州生物工程中心,暨南大学生物工程研究所
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)，广东省广州市科技攻关项目
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建立稳定高效的动物细胞表达系统对于许多重组蛋白质药物的工业化生产有着十分重大的意义.用PCR扩增得到dhfr基因,克隆入载体pIRESneo3基因以替换原有的neor基因,并将hbFGF作为报告基因插入其多克隆位点,得到重组子pIRESdhfr-hbFGF,转导CHO细胞后,MTX浓度梯度筛选稳定表达hbFGF的细胞株,ELISA与Western Blot检测培养基中hbFGF的分泌表达.结果发现10、100、1000nmol/L MTX组均检测到hbFGF的表达,其中表达量最高的一株细胞传代20次后表达
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