泡桐MSAP体系建立及引物筛选

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以豫杂一号泡桐组培苗为材料,通过对影响MSAP反应体系各主要因素的优化,建立了适于泡桐MSAP分析的反应体系.结果表明,最佳酶切体系(25μL)包含300ng模板DNA,16U的EcoRI和10U的HaplⅡ(MspⅠ),各双酶切8h后,80℃失活20min;最佳连接体系(25μL)是酶切产物20μL,0.16μm01.L^-1 EcoRⅠ接头,1.6μmol·L^-1 HapⅡ(MspⅠ)接头,2.5μL10×T4Buffer,2UT4连接酶,22℃连接18h;最佳预扩反应体系(20
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