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探讨敲低长链基因间非编码RNA-p21(lincRNA-p21)对乏氧肿瘤细胞放射敏感性的影响及机制。
方法实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测人肝癌细胞SMMC7721和脑胶质瘤细胞U251MG乏氧培养不同时间lincRNA-p21的表达。构建lincRNA-p21 siRNA慢病毒载体，经慢病毒转染建立稳定敲低lincRNA-p21的SMMC7721和U251MG细胞系。流式细胞术检测乏氧肿瘤细胞周期和凋亡。克隆形成实验检测乏氧肿瘤细胞放射敏感性。Western blot检测乏氧诱导因子1α(HIF-1α)和GLUT1蛋白含量。
结果SMMC7721和U251MG细胞乏氧(1%O2)培养24和48 h，lincRNA-p21的表达随培养时间的增加逐渐升高。24和48 h与0 h组相比，lincRNA-p21表达明显升高(t＝5.13、7.49、8.90、10.11，P<0.05)。稳定转染lincRNA-p21 siRNA下调乏氧肿瘤细胞中lincRNA-p21的表达(t＝144.81、334.32，P<0.05)。乏氧(1%O2)培养48 h，敲低lincRNA-p21细胞SMMC7721和U251MG发生G2/M期阻滞(t＝7.05、10.18，P<0.05)；细胞凋亡明显增加(t＝42.27、24.79，P<0.05)；HIF-1α和GLUT1蛋白含量减少，放射敏感性增强，放射增敏比(SER)约为1.23、1.31。
结论乏氧促进肿瘤细胞中lincRNA-p21表达。敲低lincRNA-p21增强乏氧肿瘤细胞放射敏感性，其机制可能与敲低lincRNA-p21诱导细胞G2/M期阻滞和细胞凋亡，并导致HIF-1α蛋白水平下降有关。