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目的
观察痛风患者与健康人群血清中雌二醇水平差异,雌二醇对人肾小管上皮细胞(HK-2)尿酸转运体ABC转运蛋白2(ABCG2)表达的影响,并研究磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路在雌二醇调控HK-2细胞ABCG2表达中的作用。
方法以ELISA法检测收集的16例男性痛风患者组及16qk男性健康人群组血清雌二醇水平,尿酸由自动生化仪测得。分别以不同浓度雌二醇刺激HK-2细胞24 h或48 h,以实时荧光定量PCR(qPCR)法检测ABCG2表达。以雌二醇或雌二醇及PI3K/Akt抑制剂LY294002共同刺激HK-2细胞,qPCR法检测ABCG2表达,蛋白印迹法检测Akt、p-Ser473-Akt、p-Thr308-Akt及ABCG2表达变化。采用方差分析或t检验分析数据。
结果痛风患者组血尿酸水平[(547±18)μmol/L]明显高于健康人群[(344±12)μmol/L](t=-5.395,P<0.01)。痛风患者组雌二醇水平[(45±6)μmol/L]较健康人群组[(100±8)μmol/L]明显降低(t=9.375,P<0.01)。10-4 mol/L组雌二醇刺激HK-2细胞24 h或48 h后,ABCG2 mRNA水平均升高(t=3.168,t=3.990;P<0.01)。雌二醇及PI3K/Akt抑制剂LY294002共同干预HK-2细胞组,较单以雌二醇干预组,ABCG2、p-Ser473-Akt及p-Thr308-Akt表达下降,Akt表达差异无统计学意义。
结论雌二醇与血尿酸水平有明显的相关性,雌二醇可通过激活PI3K/Akt通路发挥上调人肾小管上皮细胞ABCG2表达的作用。