探讨长链非编码RNA核富集转录体1(NEAT1)在小胶质细胞活化中的作用及潜在机制。

(1)体外常规培养小胶质细胞BV2，加入0、0.1、0.5、1 μg/mL脂多糖(LPS)刺激6 h后，RT-PCR检测细胞NEAT1 mRNA的表达；用1 μg/mL LPS刺激BV2细胞0、6、12、24 h后，RT-PCR检测细胞NEAT1 mRNA的表达；(2)将特异性NEAT1 siRNA(NEAT1-si)转染BV2细胞，RT-PCR、Western blotting分别检测NEAT1-si组和对照组细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3) mRNA和蛋白的表达；(3)将细胞分对照组、NEAT1-si组、LPS组、NEAT1-si+LPS组，RT-PCR检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA的表达，荧光倒置显微镜观察BV2细胞的形态变化；(4)将细胞分为对照组、Torin-1组和NEAT1-si+Torin-1组，Western blotting检测细胞LC3蛋白的表达，RT-PCR检测细胞LC3、TNF-α、iNOS mRNA的表达。

(1)0和0.1 μg/mL LPS组、0.5 μg/mL LPS组、1 μg/mL LPS组BV2细胞NEAT1 mRNA的表达依次增高，差异有统计学意义(P<0.05)；0、6、12、24 h组BV2细胞NEAT1 mRNA的表达依次增高，差异有统计学意义(P< 0.05)；(2)NEAT1-si组BV2细胞LC3-II mRNA的表达低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting检测显示NEAT1-si组BV2细胞LC3-II/I比值低于对照组(0.7 vs. 1.03)；(3)RT-PCR检测显示：与对照组比较，NEAT1-si组细胞TNF-α、iNOS mRNA的表达降低，与LPS组相比，NEAT1-si+LPS组细胞TNF-α、iNOS mRNA的表达降低，差异均有统计学意义(P<0.05)；(4)Western blotting检测显示对照组、Torin-1组、NEAT1-si+Torin-1组细胞LC3-Ⅱ/Ⅰ比值分别为0.7、1.14、0.97。RT-PCR结果显示：与对照组比较，Torin-1组LC3-II、TNF-α、iNOS mRNA的表达明显上调，差异有统计学意义(P<0.05)；与Torin-1组相比，NEAT1-si+Torin-1组LC3-II、TNF-α、iNOS mRNA的表达下调，差异有统计学意义(P<0.05)。

下调NEAT1表达可通过降低自噬抑制小胶质细胞的活化，NEAT1有望成为缓解和治疗神经炎症相关疾病的新靶点。