【摘 要】
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目的 探究低氧条件下miR-130a-3p靶向去乙酰化酶7(Sirt7)对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法 以HTR-8/SVneo细胞为研究对象,将miR-130a-3p inhibitor及其阴性对照inhibitor-NC转染至细胞中或联合Sirt7抑制剂97491干预,采用低氧(1%O2)处理48 h, qRT-PCR检测
【基金项目】
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湖南省自然科学基金(编号:2021JJ30626); 湖南省卫生健康委科研立项课题(编号:202105012226);
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目的 探究低氧条件下miR-130a-3p靶向去乙酰化酶7(Sirt7)对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法 以HTR-8/SVneo细胞为研究对象,将miR-130a-3p inhibitor及其阴性对照inhibitor-NC转染至细胞中或联合Sirt7抑制剂97491干预,采用低氧(1%O2)处理48 h, qRT-PCR检测细胞中miR-130a-3p及Sirt7 mRNA表达水平;Transwell检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞中Sirt7、HIF-1α、MMP-2、MMP-9、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平;TargetScan Human 7.1在线软件和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-130a-3p与Sirt7的靶向关系。结果 低氧可上调HTR-8/SVneo细胞中miR-130a-3p表达水平,下调Sirt7 mRNA和蛋白表达水平;miR-130a-3p低表达可升高Sirt7 mRNA表达水平;提高细胞迁移及侵袭能力;下调HIF-1α和E-cadherin蛋白表达水平,上调Sirt7、MMP-2、MMP-9、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平。然而,联合Sirt7抑制剂97491处理可逆转miR-130a-3p低表达对低氧细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化的促进作用。结论 miR-130a-3p在低氧诱导的滋养细胞中高表达,抑制miR-130a-3p表达可促进低氧条件下HTR-8/SVneo细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化,其可能通过靶向Sirt7调控HIF-1α实现的。
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