论文部分内容阅读
目的
探讨双报告基因分别标记肝癌细胞、骨髓间充质干细胞(hMSCs)，并利用活体成像技术动态监测肝癌细胞及骨髓间充质干细胞的可行性。
方法分别构建同时表达荧光蛋白及荧光素酶报告基因的慢病毒载体，制备慢病毒，获得增强绿色荧光蛋白(eGFP)表达阳性的Hepa1-6小鼠肝癌细胞以及mKate2表达阳性的hMSCs；应用生物发光成像在细胞及活体水平评价其发光能力；Transwell实验探讨hMSCs向Hepa1-6小鼠肝癌细胞的迁移能力。
结果成功构建慢病毒载体，并获得eGFP＋-Hepa1-6及mKate2＋-hMSCs细胞系；荧光显微镜观察细胞eGFP、mKate2表达，生物发光成像观察细胞荧光素酶表达光信号，其信号强度与细胞数目呈正相关性(R2分别为0.999和0.984)；Transwell实验观察到hMSCs向肝癌细胞趋化。
结论本研究开发构建适合荧光/生物发光双功能显像的慢病毒载体，成功转染Hepa1-6及hMSCs，为随后活体动态监测间充质干细胞对肿瘤生长情况的影响提供了可行性；并与体外实验相互印证，为研究骨髓间充质干细胞在肝癌发生发展中的作用提供了依据。