人肾尿酸转运蛋白1基因克隆、抗体制备及其在肾小管上皮细胞中的定位

来源 :解放军医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jwk000

【摘要】

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目的制备人尿酸转运蛋白1(hURAT1)多克隆抗体并利用该抗体检测hURAT1在肾组织中的表达及亚细胞定位.方法用RT-PCR方法从人肾组织中扩增出hURAT1基因全长及其抗原表位区,分别

【作者】

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吴镝张萍陈香美洪权许国双张晓洁冯哲丁瑞侯剀

【机构】

：

100853

【出处】

：

解放军医学杂志

【发表日期】

：

2005年5期

【关键词】

：

阴离子转运蛋白质类尿酸荧光抗体技术抗体 anion transport proteins uric acid fluorescent antibody

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目的制备人尿酸转运蛋白1(hURAT1)多克隆抗体并利用该抗体检测hURAT1在肾组织中的表达及亚细胞定位.方法用RT-PCR方法从人肾组织中扩增出hURAT1基因全长及其抗原表位区,分别构建绿色荧光蛋白hURAT1-pEGFP融合表达载体和GST融合表达载体pGEX-5X-1.诱导表达并纯化GST融合蛋白,利用改良的蛋白免疫法制备多克隆抗体;Western blot及免疫组化方法观察人肾组织的hUART1基因产物的表达.将hURAT1-pEGFP重组质粒转染细胞,激光共聚焦显微镜动态观察hURAT1-p

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