【摘 要】
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目的 观察姜黄素对人肝癌细胞HCC-LM3增殖和凋亡的影响并探究其相关机制.方法 采用CCK-8法检测经不同浓度姜黄素作用后的人肝癌细胞HCC-LM3的生长抑制率,初步观察姜黄素对人
【机 构】
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450052,郑州大学第一附属医院肝胆胰外科河南省肝脏移植中心河南省消化器官移植重点实验室
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目的 观察姜黄素对人肝癌细胞HCC-LM3增殖和凋亡的影响并探究其相关机制.方法 采用CCK-8法检测经不同浓度姜黄素作用后的人肝癌细胞HCC-LM3的生长抑制率,初步观察姜黄素对人肝癌细胞HCC-LM3作用.参考相关文献,以0μmol/L浓度组为空白对照,以2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、40.0、60.0μmol/L为浓度梯度加入姜黄素,培养48 h后进行检测.依据CCK-8法检测结果,选择其中生长抑制率差异较明显的10.0、20.0、40.0 μmol/L的浓度组为实验组,并以0 μmoL/L浓度组为对照组,细胞克隆形成实验检测细胞的克隆能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测Mcl-1、Bax、Bcl-2和Bcl-xL蛋白的表达水平.计量资料用((x)±s)表示,组间比较用单因素方差分析.结果 CCK-8法检测显示,姜黄素浓度为2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、40.0、60.0 μmol/L对应的人肝癌细胞HCC-LM3的生长抑制率分别为(6.71±3.45)％、(12.33±5.02)％、(20.07±5.60)％、(57.80±7.34)％、(78.37±6.53)％、(91.73±6.14)％和(96.18±3.45)％,提示姜黄素可抑制人肝癌细胞HCC-LM3的生长,并呈浓度依赖性.细胞克隆形成实验结果提示,姜黄素能够抑制人肝癌细胞HCC-LM3的克隆能力,当姜黄素浓度＞20.0 μmol/L时,人肝癌细胞HCC-LM3克隆形成受到显著的抑制.流式细胞术检测对照组和实验组的细胞凋亡率依次为(5.20±1.44)％、(9.90±3.31)％、(55.67 ±5.29)％、(79.63±4.71)％,各实验组凋亡率均高于对照组(P＜0.05),提示姜黄素可诱导人肝癌细胞HCC-LM3凋亡.Western blotting检测结果发现,经姜黄素作用后人肝癌细胞HCC-LM3中的Mcl-1蛋白表达降低(P＜0.05),Bax蛋白表达增加(P＜0.05),并呈浓度依赖性;而对Bcl-2抑凋亡蛋白家族另外2个主要蛋白Bcl-2和Bcl-xL则没有明显影响(P＞0.05).结论 姜黄素可抑制人肝癌细胞HCC-LM3的克隆、增殖,诱导人肝癌细胞HCC-LM3凋亡.
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