【摘 要】
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目的：构建表达HIV-1包膜蛋白ENV的慢病毒载体,感染人胚肾细胞HEK293T,观察env基因在HEK293T中的表达。方法：通过点突变获得HIV-1 env完整基因,将env基因亚克隆至慢病毒穿梭载体
【机 构】
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军事医学科学院军事兽医研究所,延边大学农学院
【基金项目】
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国家自然科学基金（81001342）, 973计划（2011CB512110）, 吉林省自然科学基金（201015116）, 吉林省高新技术产业发展项目（2010）, 长春市科技特派员行动计划（09KT04）
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目的：构建表达HIV-1包膜蛋白ENV的慢病毒载体,感染人胚肾细胞HEK293T,观察env基因在HEK293T中的表达。方法：通过点突变获得HIV-1 env完整基因,将env基因亚克隆至慢病毒穿梭载体pLVX-IRES-ZsGreen1的EcoRⅠ、XhoⅠ位点,构建重组质粒pLV-env,采用脂质体转染法转染HEK293T,经RT-PCR、Western blot检测目的基因表达,同时利用激光共聚焦技术对env基因的表达进行了定位。结果：成功获得了HIV-1 env基因,构建了重组慢病毒质粒pLV-
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