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目的探讨微小RNA-34b(mi R-34b)促进关节软骨细胞基质退变的分子机制。方法提取10例骨关节炎(OA)患者和7例创伤性截肢者的膝关节软骨组织,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-q PCR)法检测组织标本中mi R-34b表达水平。利用Ta rg e ts c a n基因信息软件预测得到mi R-34b靶基因为Sma d 3,构建Sma d 3野生型及突变型3′非编码区(3′-UTR)-荧光素酶报告载体,利用荧光素酶报告基因实验检测mi R-34b对Smad3基因野生型及突变型3′-UTR荧光素酶活性的影响。体外培养SW1353细胞,分为A、B、C和D组,分别加入等量脂质体、无义序列、mi R-34b模拟物(mi R-34b mimic)和mi R-34b抑制物(mi R-34b inhibitor)。RT-q PCR法检测mi R-34b、Smad3、Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达水平。结果 OA软骨组织中mi R-34b表达水平较正常膝关节软骨组织明显上调(P<0.05)。SW1353细胞转染后,与A组比较,C组mi R-34b表达水平明显升高(P<0.05),D组明显降低(P<0.05);A组与B组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Targets Can软件预测mi R-34b的潜在靶基因为Smad3,荧光素酶报告基因实验证实mi R-34b直接靶向抑制靶基因Smad3;转染mi R-34b mimic和mi R-34inhib itor后,与A组比较,C组Sma d 3 m RNA表达水平明显降低(P<0.05),D组明显升高(P<0.05);A组与B组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。转染后,与A组比较,C组Ⅱ型胶原m RNA表达水平明显降低(P<0.05),D组明显升高(P<0.05);C组MMP-13m RNA明显升高(P<0.05),D组明显降低(P<0.05)。结论 mi R-34b可能通过抑制其靶基因Sma d 3的表达进而诱导人关节软骨细胞基质退变,从而促进OA的发生、发展。