【摘 要】
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目的 探讨单用肝再生磷酸酶-3(PRL-3)抗体或联合培美曲塞(Pem)对人肺腺癌细胞A549凋亡的作用机制.方法 将体外培养的A549细胞分为4组:PRL-3组(PRL-3抗体,164 ng·mL-1)、Pem组(Pem,180 ng·mL-1)、联合组(PRL-3抗体+Pem)、溶剂对照组(二甲基亚砜)和空白组(不给予药物),4组均培养24 h.流式细胞技术检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测周期蛋白E(CyclinE)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)和Bcl-2相
【机 构】
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华北理工大学 附属医院 胸外科,河北 唐山063000
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目的 探讨单用肝再生磷酸酶-3(PRL-3)抗体或联合培美曲塞(Pem)对人肺腺癌细胞A549凋亡的作用机制.方法 将体外培养的A549细胞分为4组:PRL-3组(PRL-3抗体,164 ng·mL-1)、Pem组(Pem,180 ng·mL-1)、联合组(PRL-3抗体+Pem)、溶剂对照组(二甲基亚砜)和空白组(不给予药物),4组均培养24 h.流式细胞技术检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测周期蛋白E(CyclinE)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平(灰度值),酶联免疫吸附法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)水平.结果 空白组、溶剂对照组、PRL-3组、Pem组和联合组的细胞总凋亡率分别为(3.87±1.27)％,(3.99±1.32)％,(17.54±2.59)％,(12.27±2.22)％和(32.51±3.77)％;上述5组Cyclin E蛋白表达水平分别为24.72±1.24,23.08±1.28,14.47±1.35,16.78±1.77和9.35±1.21;上述5组CDK2蛋白表达水平分别为39.01±1.87,39.21±1.98,32.35±1.23,28.35±1.17和17.37±1.08;上述5组Bcl-2蛋白表达水平分别为37.89±3.88,36.69±3.79,22.47±3.32,25.57±3.65和15.66±3.54;上述5组Bax蛋白表达水平分别为8.58±0.54,8.87±0.64,18.25±0.79,23.89±1.24和34.99±1.65;上述5组SOD分别为(6.21±0.71),(6.17±0.58),(9.23±1.47),(8.25±0.98)和(17.58±1.45)U·mL-1;上述5组ROS分别为(3.74±0.44),(3.68±0.38),(1.22±0.25),(1.87±0.29),和(0.90±0.12)MFI of DCF;上述5组MDA分别为(13.56±1.58),(13.24±1.35),(7.78±0.95),(9.25±1.04)和(4.32±0.52)μmol·L-1.3个给药组与空白组和溶剂对照组比较,各指标差异均有统计学意义(均P<0.05);联合组与PRL-3组和Pem组比较,各指标差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 联合组可能通过抑制A549细胞周期进程,促进细胞凋亡,降低氧化应激水平,表现抗肿瘤活性.
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