腺病毒载体转染人大隐静脉平滑肌细胞效率的研究

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目的探讨提高静脉壁通透性对腺病毒为载体向人大隐静脉平滑肌细胞转外源基因效率的影响.方法人体大隐静脉经机械拉伸、腔内加压灌注携β-半乳糖酶基因的腺病毒溶液.器官培养0、2 d后,进行免疫组织化学染色和扫描电镜观察.研究机械因素对静脉组织形态的改变、鉴定转基因靶细胞成份、比较各组平滑肌细胞的转染率.14 d时,进行核增殖抗原免疫组织化学和弹力纤维染色,比较各组平滑肌细胞增殖指数和内膜增生程度,观察机械因素对培养静脉的远期影响.结果机械牵拉和加压灌注后,静脉形态结构完整,内皮未受损伤,细胞间出现微小孔隙.中膜平滑肌细胞的转染率达到(21.1±3.8)%.对照组静脉内皮细胞间无间隙,仅(0.8±0.2)%中膜平滑肌细胞表达β-半乳糖酶.培养14 d后平滑肌细胞增生指数和内膜增生程度在各组间差别无显著性.结论提高静脉通透性可提高腺病毒载体对中膜平滑肌细胞的转基因效率.

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