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副鸡嗜血杆菌病可做涂片镜检呈两极浓染,分离培养蘸取分泌物的棉拭子直接在鲜血琼脂培养基上进行划线接种,通过烛缸置于37℃的条件下培养2 d即可。药敏试验可分别采用磺胺嘧啶、磺胺米隆以及新诺明等磺胺类药物和氟苯尼考、罗红霉素、土霉素、新霉素等广谱抗菌药物。血清学试验和动物接种试验及ELISA和PCR也可对本病进行诊断。