【摘 要】
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目的 鉴定在糖尿病性小鼠心肌和糖尿病性心肌纤维化细胞模型中一致上调表达的长链非编码RNA(lncRNA).方法 通过Masson染色检测糖尿病db/db小鼠和db/m对照小鼠心肌中的胶原含
【机 构】
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广东省心血管病研究所,广东省人民医院医学研究部,广东省医学科学院,广东广州510080
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目的 鉴定在糖尿病性小鼠心肌和糖尿病性心肌纤维化细胞模型中一致上调表达的长链非编码RNA(lncRNA).方法 通过Masson染色检测糖尿病db/db小鼠和db/m对照小鼠心肌中的胶原含量.用小鼠lncRNA表达谱芯片检测小鼠心肌中lncRNA表达,用荧光定量PCR鉴定6个代表性的在糖尿病性心肌中高表达的lncRNAs.用33mmol/L葡萄糖分别和0.1、0.2、0.4、0.6 mU葡萄糖氧化酶处理小鼠心肌成纤维细胞,通过检测纤维化相关基因α-SMA、Col1a1和Col3a1表达来确定合适的葡萄糖/葡萄糖氧化酶(HG/Go)处理条件.用确定条件的HG/Go处理小鼠心肌成纤维细胞,用荧光定量PCR鉴定在糖尿病性心肌和糖尿病性心肌纤维化细胞模型中一致上调表达的IncRNA.结果 Masson染色显示,糖尿病db/db小鼠心肌的胶原含量显著升高,与对照小鼠比较差异有统计学意义(P＜0.01).同db/m对照小鼠相比,糖尿病db/db小鼠心肌中lncRNA出现差异性表达,其中354个lncRNAs呈1.5倍以上高表达,292个lncRNAs呈1.5倍以上下调表达.检测的6个代表性上调表达的lncRNAs中,AK014842、AK076377和BF607975表达在糖尿病性心肌中显著上调.33 mmol/L葡萄糖结合0.2、0.4 mU Go可以有效上调小鼠心肌成纤维细胞中α-SMA和Col3a1表达.荧光定量PCR结果显示,AK014842和BF607975在33mmol/L葡萄糖结合0.2 mU Go处理的小鼠心肌成纤维细胞中表达显著升高.结论 LncRNA AK014842和BF607975在糖尿病性心肌和糖尿病性心肌纤维化细胞模型中一致上调表达.
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