烟草NtNHX2基因的克隆及不同逆境下表达模式分析

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为了明确NHX(Na~+/H~+exchanger)家族成员NHX2在烟草中的功能与对非生物逆境胁迫的响应机制,本研究从烟草栽培品种K326中NtNHX2同源克隆NtNHX2基因,利用qRT-PCR分析该基因在不同非生物逆境下的表达模式,综合生物信息学分析,对其功能和调控机制进行初步预测。该基因开放阅读框为1 605 bp,编码534个氨基酸,预测分子量为59.0 k D,理论等电点pI为8.67。同源性分析结果显示,该基因与美花烟草NHX2(Nicotiana sylvestris NHX2)、野生烟草NHX2(Nicotiana attenuate NHX2)等具有较高的氨基酸序列同源性,分别为98.70%、98.14%,组织表达分析结果表明,该基因在根、茎、叶、花中均有表达,且在叶中表达量最高。逆境胁迫处理表明,该基因表达在高盐、低钾、4℃条件下受到抑制,在干旱、ABA处理下受到诱导调控,说明NtNHX2参与高盐、低钾、4℃、干旱、ABA非生物逆境胁迫的响应,为NtNHX2的功能研究、探讨其耐盐机制及基因利用提供了理论依据。
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