反相高效液相色谱结合柱前衍生化法测定人血清中L-门冬酰胺

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目的:建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)快速准确测定人血清中L-门冬酰胺(L-ASN)。方法:用已耗竭L-ASN的人血清为空白生物基质建立标准曲线,邻苯二甲醛在线柱前衍生样品,ZORBAX Eclipse AAA柱(4.6 mm×150 mm,5μm)分离衍生化产物。采用内标法根据荧光响应值定量分析。结果:L-ASN与内标高丝氨酸的衍生物均在16 min内出峰,在2~100μmol.L-1的范围内方法线性关系良好(r>0.999),最低定量限为2μmol.L-1,日内与日间精密度(RSD)均小于12.9%,回收率在96.9%~108.3%之间,平均提取回收率为58.2%,血清中L-ASN-80℃冻存四周保持稳定。结论:建立了RP-HPLC结合柱前衍生化测定人血清中L-ASN的方法,并应用于临床血清样品中L-ASN的定量测定。
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