疏肝益肾方对他莫昔芬耐药人乳腺癌细胞株HER2-ERK/MAPK-ERα通路的影响

来源 :国际中医中药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kakingka
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目的:研究疏肝益肾方对他莫昔芬(TAM)耐药的人乳腺癌细胞株(MCF-7)LCC9 HER2-ERK/MAPK-ERα通路的调控作用。方法采用中药血清药理学方法制备大鼠含疏肝益肾方中药血清,疏肝益肾方+TAM联合血清、空白对照血清、TAM阳性对照血清,并体外作用于LCC9细胞。MTT法观察各组含药血清对LCC9细胞株的抑制率,RT-PCR检测各组雌激素受体1(ESR1)、人类表皮生长因子受体2(ERBB2)、重组人丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)mRNA的水平,蛋白印迹法检测各组雌激素受体α(ERα)、人类表皮生长因子受体2(HER2)、胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)、磷酸化胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(p-ERK/MAPK)蛋白的表达。结果 MTT结果显示,TAM组、疏肝益肾方组、疏肝益肾方+TAM联合组在48 h的抑制作用最强,抑制率分别是(6.61±0.129)%、(47.43±2.243)%、(54.19±3.364)%,与空白组比较,疏肝益肾方组、疏肝益肾方+TAM联合组抑制作用显著(P<0.05),且疏肝益肾方+TAM联合组作用优于疏肝益肾方组(P<0.05)。TAM组与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR结果显示,疏肝益肾方+TAM联合组的ESR1 mRNA表达量在48 h为(2.282±0.185),较空白组升高(P<0.05);ERBB2、MAPK3 mRNA表达量在48 h分别为(0.71±0.095)、(0.336±0.058),较空白组下降(P<0.05)。Western blot结果显示,疏肝益肾方+TAM联合组在48 h时,HER2、p-ERK/MAPK的蛋白表达量分别为(0.708±0.072)、(0.228±0.034),较空白组明显下降(P<0.05);ERα的蛋白表达为(1.936±0.145),较空白组升高(P<0.05),对ERK/MAPK无明显影响(P>0.05)。结论疏肝益肾方与TAM联合应用对TAM耐药乳腺癌细胞株MCF-7 LCC9有抑制作用,且48 h抑制作用最强。
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