【摘 要】
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介绍一种 DNA体外复制所需胞浆蛋白提取物快速制备的新方法。方法 :透析液与传统方法不同之处在于 1蔗糖含量为2 0 % ;2 Na Cl浓度从 5 0 m mol/ L 减少到 2 5 mm ol/ L。使
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介绍一种 DNA体外复制所需胞浆蛋白提取物快速制备的新方法。方法 :透析液与传统方法不同之处在于 1蔗糖含量为2 0 % ;2 Na Cl浓度从 5 0 m mol/ L 减少到 2 5 mm ol/ L。使用的培养细胞为 2 5～ 5 0 μl,用 5倍细胞体积 ( PCV)的低渗缓冲液重新制成悬浮液。在冰上裂解 10分钟
A new method for rapid preparation of extracellular cytoplasmic proteins for DNA in vitro replication is described. Methods: The difference between the dialysis solution and the traditional method is that the content of sucrose is 20%; the concentration of 2 NaCl is reduced from 50 mmol / L to 25 mmol / L. The culture cells used are 25 to 50 μl and resuspended in a hypotonic buffer of 5 times the cell volume (PCV). Crack on ice for 10 minutes
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