【摘 要】
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目的通过体外实验探讨肿瘤坏死因子-alpha(TNF-α)对鼠肺成纤维细胞增殖的信号转导机制。方法实验分为5组:空白对照组;TNF-α组;TNF-α分别联合10-7、10-6和10-5mol/L佛司克
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目的通过体外实验探讨肿瘤坏死因子-alpha(TNF-α)对鼠肺成纤维细胞增殖的信号转导机制。方法实验分为5组:空白对照组;TNF-α组;TNF-α分别联合10-7、10-6和10-5mol/L佛司克林(FSK)组。SD大鼠乳鼠肺成纤维细胞进行传代培养,刺激培养肺成纤维细胞4和24 h后,用氯氨T法检测细胞培养上清液中羟脯氨酸的含量;用荧光细胞免疫组化技术测定成纤维细胞内磷脂酶C(PLC)和蛋白激酶C(PKC)的表达;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测成纤维细胞内环-磷酸腺苷(cAMP)的含量。结果在同一时间点,单独TNF-α组较空白对照组羟脯氨酸含量和PLC、PKC表达水平升高,TNF-α联合FSK后较单独TNF-α组羟脯氨酸含量和PLC、PKC表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);PLC、PKC结果还显示,随TNF-α联合FSK作用时间的延长,PLC、PKC表达减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。TNF-α诱导PLC和PKC表达的同时,也能提高cAMP水平,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。当TNF-α联合FSK后能进一步促进cAMP表达,与单独TNF-α组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TNF-α对成纤维细胞增殖有促进作用。FSK能以剂量依赖关系提高cAMP水平,降低TNF-α诱导的成纤维细胞增殖信号PLC和PKC的表达,从而使羟脯氨酸含量降低。
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