P—糖蛋白表达质粒的构建及转基因细胞系的建立

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目的构建P-糖蛋白表达质粒,建立转基因P-糖蛋白细胞系.方法将pMDRA1 cDNA片段亚克隆至表达载体pcDNA3.1(+),用Superfecttransfection reagent将重组质粒pcDNA3.1(+)/MDR1转染到中国人乳腺癌细胞Bcap37,经G418筛选获得抗性克隆,并扩大成系.通过药敏试验验证转基因细胞的功能.结果酶切结果显示表达质粒构建正确.药敏试验未转染与转染的Bcap37细胞对阿霉素的IC50分别为(0.11土0.07)μg/ml和(51.24士13.01)μg/ml(P
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