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【摘要】目的：建立HPLC法测定中风复原丸中丹参酮ⅡA含量的方法。方法：采用Eclipse XDB-C18色谱柱，甲醇—水（75：25）为流动相；流速0.6ml•min-1；检测波长270nm。结果：丹参酮ⅡA在17.2~154.8μｇ范围内线性关系良好（r=0.9998），平均回收率为98.19%，RSD=0.79%（n=6）。结论：本方法操作简便，专属性强，结果准确，可用于中风复原丸的质量控制。
【关键词】丹参酮ⅡA；高效液相色谱法；含量测定
HPLC determination of Tanshinone Ⅱ Ainzhongfengfuyuanpill
Cui Hongbin
（Shangqiu institute for food and drug control，Henan，Shangqiu476000）
【ABSTACTCT】Objective：To establish a HPLC method to determination of Tanshinone Ⅱ A in zhongfengfuyuanpill. Method：The chromatographic system consisted of C18 column，using methanol -waters（75：25）as mobile phase.The content was detected at a waveleng of 270 nm，the flow rate was 0.6ml•min-1 .Results：The Tanshinone Ⅱ A have a goodtincar rolatim in the range of17.2~154.8μｇ（r=0.9998），the average recovery was 98.19% and RSD=0.79%（n=6）. Conolusion：The established method is accuracy，sensitive and simple.It can be used for quality control of zhongfengfuyuanpill.
【KEY WORDS】Tanshinone Ⅱ A；HPLC；Determination
中风复原丸是由龙骨、牡蛎、山羊角、水牛角、丹参等药材加工制成的医院制剂，具有平肝潜阳，醒脑，养阴通络之功效，用于中风后遗症，症见肢体偏瘫，头晕头胀，头目昏沉，烦躁易怒。[1]现行质量标准中未收载含量测定项目，不能有效的控制药品质量。丹参为方中主药，丹参酮ⅡA是丹参的主要有效成分[2]，本文以丹参酮ⅡA为指标成分，建立了中风复原丸中丹参酮ⅡA的高效液相测定法，为该制剂的质量控制提供了客观的含量评价方法。
1仪器与试药
1.1仪器
Agilengt 1200型高效液相色谱仪，AUW-220D电子分析天平，5210DT超声处理器
1.2试药
丹参酮ⅡA对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110766-200518）；甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。中风复原丸（由市中医院提供，批号：091023、100814、101124）。
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱：Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6×150mm）
流动相：甲醇—水（75：25）为流动相[3]；流速0.6ml•min-1；检测波长270nm；进样量5μl；理论板数应不低于2000。
2.2线性关系考察
取丹参酮ⅡA对照品约10mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置10 ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。按照“2.1”项色谱条件，分别进样1、3、5、7、9μl，记录丹参酮ⅡA峰面积值，以峰面积积分值（Y）对对照品进样量（X）进行线性回归，得回归方程：Y=7.099X+2.029r=0.9998。结果表明，丹参酮ⅡA对照品进样量在17.2~154.8μｇ范围内与峰面积值呈良好的线性关系。
2.3对照品溶液的制备
取丹参酮ⅡA对照品约10mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置10 ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2.4供试品溶液及阴性对照溶液的制备
取本品约2.0g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。另取缺丹参的其他味药按处方工艺制成阴性制剂，按上述方法制备阴性对照溶液。
2.5干扰试验
取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各5μl，按照“2.1”项色谱条件，分别进样测定，记录色谱图，结果见图1。
A对照品溶液
B供试品溶液
C阴性对照溶液
图1高效液相色谱图
2.6精密度试验
取同一对照品溶液，重复进样5次，每次5μl，记录峰面积，RSD=0.65%（n=5），表明精密度良好。
2.7稳定性试验
取同一对照品溶液，分别在0、1、2、3、4、5、6h进样测定，RSD=0.71%，供试品溶液在6小时内峰面积基本稳定。
2.8加样回收率试验
称取6份已知含量为0.1097mg/g的样品约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，另分别精密量取对照品溶液5.00ml，按照“2.4”项下供试品溶液制备方法制备溶液，按照“2.1”项色谱条件，分别测定，结果见表1。
表1加样回收率试验结果
2.8样品测定
取3批样品，按“2.4”项下方法制备供试液，各进样5μl，按外标法计算丹参酮ⅡA的含量，结果见表2。
表23批样品中丹参酮ⅡA的含量
3讨论
本方法操作简便，具有较强的专属性，回收率好，能够更有效的控制该制剂质量的质量。
参考文献
[1]河南省医疗机构制剂标准
[2]王湛. HPLC测定调经活血片中丹参的含量 [J].中外医学研究.2010.08（22）：68-69
[3]中国药典[S].2010年版.一部.70-71
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【关键词】丹参酮ⅡA；高效液相色谱法；含量测定
HPLC determination of Tanshinone Ⅱ Ainzhongfengfuyuanpill
Cui Hongbin
（Shangqiu institute for food and drug control，Henan，Shangqiu476000）
【ABSTACTCT】Objective：To establish a HPLC method to determination of Tanshinone Ⅱ A in zhongfengfuyuanpill. Method：The chromatographic system consisted of C18 column，using methanol -waters（75：25）as mobile phase.The content was detected at a waveleng of 270 nm，the flow rate was 0.6ml•min-1 .Results：The Tanshinone Ⅱ A have a goodtincar rolatim in the range of17.2~154.8μｇ（r=0.9998），the average recovery was 98.19% and RSD=0.79%（n=6）. Conolusion：The established method is accuracy，sensitive and simple.It can be used for quality control of zhongfengfuyuanpill.
【KEY WORDS】Tanshinone Ⅱ A；HPLC；Determination
中风复原丸是由龙骨、牡蛎、山羊角、水牛角、丹参等药材加工制成的医院制剂，具有平肝潜阳，醒脑，养阴通络之功效，用于中风后遗症，症见肢体偏瘫，头晕头胀，头目昏沉，烦躁易怒。[1]现行质量标准中未收载含量测定项目，不能有效的控制药品质量。丹参为方中主药，丹参酮ⅡA是丹参的主要有效成分[2]，本文以丹参酮ⅡA为指标成分，建立了中风复原丸中丹参酮ⅡA的高效液相测定法，为该制剂的质量控制提供了客观的含量评价方法。
1仪器与试药
1.1仪器
Agilengt 1200型高效液相色谱仪，AUW-220D电子分析天平，5210DT超声处理器
1.2试药
丹参酮ⅡA对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110766-200518）；甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。中风复原丸（由市中医院提供，批号：091023、100814、101124）。
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱：Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6×150mm）
流动相：甲醇—水（75：25）为流动相[3]；流速0.6ml•min-1；检测波长270nm；进样量5μl；理论板数应不低于2000。
2.2线性关系考察
取丹参酮ⅡA对照品约10mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置10 ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。按照“2.1”项色谱条件，分别进样1、3、5、7、9μl，记录丹参酮ⅡA峰面积值，以峰面积积分值（Y）对对照品进样量（X）进行线性回归，得回归方程：Y=7.099X+2.029r=0.9998。结果表明，丹参酮ⅡA对照品进样量在17.2~154.8μｇ范围内与峰面积值呈良好的线性关系。
2.3对照品溶液的制备
取丹参酮ⅡA对照品约10mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置10 ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2.4供试品溶液及阴性对照溶液的制备
取本品约2.0g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。另取缺丹参的其他味药按处方工艺制成阴性制剂，按上述方法制备阴性对照溶液。
2.5干扰试验
取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各5μl，按照“2.1”项色谱条件，分别进样测定，记录色谱图，结果见图1。
A对照品溶液
B供试品溶液
C阴性对照溶液
图1高效液相色谱图
2.6精密度试验
取同一对照品溶液，重复进样5次，每次5μl，记录峰面积，RSD=0.65%（n=5），表明精密度良好。
2.7稳定性试验
取同一对照品溶液，分别在0、1、2、3、4、5、6h进样测定，RSD=0.71%，供试品溶液在6小时内峰面积基本稳定。
2.8加样回收率试验
称取6份已知含量为0.1097mg/g的样品约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，另分别精密量取对照品溶液5.00ml，按照“2.4”项下供试品溶液制备方法制备溶液，按照“2.1”项色谱条件，分别测定，结果见表1。
表1加样回收率试验结果
2.8样品测定
取3批样品，按“2.4”项下方法制备供试液，各进样5μl，按外标法计算丹参酮ⅡA的含量，结果见表2。
表23批样品中丹参酮ⅡA的含量
3讨论
本方法操作简便，具有较强的专属性，回收率好，能够更有效的控制该制剂质量的质量。
参考文献
[1]河南省医疗机构制剂标准
[2]王湛. HPLC测定调经活血片中丹参的含量 [J].中外医学研究.2010.08（22）：68-69
[3]中国药典[S].2010年版.一部.70-71
“本文中所涉及到的图表、公式、注解等请以PDF格式阅读”