【摘 要】
：
表达去除SD0803 E2基因跨膜疏水区的sE2蛋白并制备其抗体,为猪源BVDV诊断奠定基础.RT-PCR扩增SD0803株sE2基因,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-sE2,转化BL21(DE3),IPTG诱导蛋
【机 构】
：
四川农业大学动物医学院,中国农业科学院上海兽医研究所,西昌学院动物科学学院,南京农业大学动物医学院
论文部分内容阅读
表达去除SD0803 E2基因跨膜疏水区的sE2蛋白并制备其抗体,为猪源BVDV诊断奠定基础.RT-PCR扩增SD0803株sE2基因,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-sE2,转化BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,以纯化的重组蛋白为抗原免疫家兔制备多克隆抗体.采用间接ELISA、Western blot、间接免疫荧光等方法鉴定获得的抗体.结果显示,抗体效价最高可达1∶256 000;制备的抗体可与rsE2蛋白特异性结合；该抗体可特异性识别BVDV感染MDBK细胞表达的E2蛋白,显示抗体高度的特异性.成功构建pGEX-4T-1-sE2原核表达质粒,诱导其表达的蛋白免疫家兔,成功制备的猪源BVDV SD0803株E2抗体.
其他文献
[目的]建立悬乳剂中咪鲜胺和丙环唑含量的HPLC法快速分析方法。[方法]以SHIMADZU 10-A VP Plus高效液相色谱仪,Kromasil 100-5-C18不锈钢色谱柱的高效液相色谱法测定杀菌悬乳
研究了形状记忆合金复合材料系统的非线性动力学特性.基于Brinson的形状记忆合金本构关系和Dejonghe的内耗模型,提出了单自由度简化系统的模型建立方法.考虑材料系统刚度和阻
为客观、定量了解黄曲霉毒素B1中毒前后犬血液生化指标的变化,本研究采用全自动生化分析仪分别测定30头犬黄曲霉毒素B1中毒前后血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、胆碱酯酶、总胆
本研究采用PCR-SSCP技术检测边鸡肌肉生长抑制素(MSTN)基因5'调控区的单核苷酸多态性,并与边鸡的生长性状进行关联分析.结果表明:在MSTN基因5'调控区检测到4个突变(C1346T、G
因动物种类、生理机制和生产目的不同,动物对微量元素铜的需求有很大的差异.由铜缺乏或过量引起代谢平衡失调所致的疾病,给绒山羊养殖业常造成巨大经济损失和困扰,在畜牧生产
石化污水场所逸散的臭气主要来源于平流隔油池进出口,其主要成分为烃类等易挥发有机物.经封闭后有组织排放的废气,采用浓度调整-吸附脱硫-催化燃烧工艺技术处理,可达到国家废
以早熟晚粳品种武运粳7号、武香粳14、常优l号为供试材料,通过搁田后一次性追肥试验来精确确定高产高效的氮肥后移施用叶龄期；在此基础之上,对氮肥精确后移施用模式进行了研究
目的 探索人舌黏膜上皮细胞和脱细胞支架体外复合构建组织工程尿道的可行性.方法 前尿道狭窄患者10例,手术切取0.5 cm×0.8 cm大小舌黏膜组织,分离获得舌黏膜上皮细胞,AE1/AE
试验研究日粮添加复合异位酸对山羊瘤胃消化代谢的影响.采用3×3拉丁方试验设计,选用3头安装有永久性瘤胃和十二指肠近端瘘管,平均体重为(25.4±0.75 )kg的健康麻城黑山羊为
目的 建立可同时筛选和定量检测成熟型miR的荧光定量PCR方法.方法 改良通用茎环引物,在其茎环尾端引入8个随机碱基片段,用于成熟型miR逆转录,以建立SYBR Green PCR筛选和定量