【摘 要】
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将含有猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅱ基因的质粒pET-ApxⅡ转化到大肠杆菌BL21(DE3).挑选出表达量最高的克隆子,于37℃经IPTG诱导表达.对表达条件进行优化,并对包涵体进行了提纯和
【基金项目】
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国家自然科学基金，湖北省科技攻关项目，湖北省自然科学基金
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将含有猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅱ基因的质粒pET-ApxⅡ转化到大肠杆菌BL21(DE3).挑选出表达量最高的克隆子,于37℃经IPTG诱导表达.对表达条件进行优化,并对包涵体进行了提纯和复性.用复性后的蛋白作抗原,建立了检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗体的间接ELISA.试验的最佳反应条件为:最佳抗原稀释度为1:160,抗原包被液用Tris-HCl(pH8.0),封闭液用含0.4%BSA的PBST,血清稀释度为1:40,二抗稀释度为1:6 000,稀释液用含0.4% BSA的PBST,血清反应时间为30 m
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