人乳头瘤病毒58型L1壳蛋白在原核细胞中的高效表达及抗体制备

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hstiantian
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目的人乳头瘤病毒58型(HPV58)是重要的高度致瘤性病毒之一,用原核细胞表达HPV58 L1主要壳蛋白(McP),并制备相应抗体血清,为基因工程疫苗研制打下基础.方法用聚合酶链反应(PCR)扩增HPV58 L1完整编码区基因,并克隆、测序.构建原核表达载体pRSETB 58 L1,表达的L1蛋白经SDS-PAGE纯化,免疫BALB/c小鼠.结果在原核细胞中表达了HPV58 L1壳蛋白,该壳蛋白的相对分子质量为60 000,此蛋白与HPV16 L1抗体有交叉反应.获得抗HPV58 L1壳蛋白特异性抗体,抗体滴度为1∶80,并用该抗体鉴定了昆虫细胞中表达的HPV58 L1壳蛋白.结论 HPV58壳蛋白在原核细胞中获得有效表达,纯化免疫小鼠后能产生抗HPV58 L1特异性抗体,此抗体可用于鉴定真核细胞表达的HPV58 L1壳蛋白.

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目的 通过研究HIV-1 Vpr基因在宫颈癌细胞HeLa中诱导细胞周期G2停滞、细胞致死效应及其核定位功能,探讨将Vpr用于肿瘤治疗的可能性。方法 用脂质体转染的方法 ,将携带Vpr或其突变体VprX基因的质粒转入HeLa细胞内,用流式细胞仪分析Vpr诱导的G2停滞和细胞致死性;用荧光显微镜观察GFP-Vpr融合蛋白的荧光确定其核定位功能。结果 Vpr具有核定位功能。Vpr和VprX蛋白都具有细胞
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