论文部分内容阅读
目的构建1型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）反式激活因子（Tat）基因真核表达质粒，并研究该质粒在真核细胞中的有效表达。方法以含有HIV-1全长基因的质粒pNIA-3为模板，通过PCR扩增HIV-1 tat第一外显子，应用基因工程技术将扩增的基因片段插入真核表达质粒pCDNA3．1（＋），构建重组真核表达质粒pCDNA3．1-tat，经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后，应用脂质体转染技术转染入人体肝癌细胞系Huh-7细胞。RT—PCR检测其基因转录情况，Western blot鉴定其是否能够表达相应的目