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[目的]从分支杆菌培养物中提取DNA,扩增结核分支杆菌MPT83蛋白基因,并在大肠杆菌中进行表达、克隆和鉴定。[方法]从分支杆菌培养物中提取总DNA,扩增MPT83因并克隆入T载体,将目的基因插入表达载体pET-32a(+)中,转化BL21宿主菌,IPTG诱导表达构建的表达质粒pET—MPT83经PCR和BamH Ⅰ+Hind Ⅲ双酶切进行鉴定。[结果]经SDS—PAGE分析,在约42ku处出现新的蛋白条带,5h后表达量即达到高峰;Westemblotting分析表明,融合蛋白能够被分支杆菌阳性血清所识别