集成干扰素突变体Ⅱ的分子构建、表达及提纯

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目的:通过定点突变,构建集成干扰素突变体Ⅱ(IFN—Con—m2),以期获得兼具高效作用和可定点聚乙二醇(PEG)修饰的新型药物分子。方法:采用PCR体外定点突变技术,使集成干扰素突变体Ⅰ(IFN-Con-m1)基因的第86位密码子由TAC突变为TGC。将扩增片段克隆入pET-23b表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。IPTG诱导后,表达的IFN—Con—m2经包涵体变复性、疏水层析、DEAE层析和凝胶过滤层析等纯化后,用WISH—VSV系统进行生物活性测定。结果:IFN—Con—m2以包涵
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