【摘 要】
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目的从原代培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)提取细胞总RNA,采用逆转录PCR(RT-PCR)方法得到VEGF受体KDR全长胞外区cDNA 片段,检验其体内抗肿瘤血管生成的作用.方法将获得的
【机 构】
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北京大学第一医院泌尿外科研究所,中国预防医学科学院病毒学研究所
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划);
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目的从原代培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)提取细胞总RNA,采用逆转录PCR(RT-PCR)方法得到VEGF受体KDR全长胞外区cDNA 片段,检验其体内抗肿瘤血管生成的作用.方法将获得的受体基因克隆到AAV基因治疗载体pSNAV中,得到重组质粒pSNAV/KDR.重组质粒转染BHK细胞,加入辅助病毒后,得到表达目的蛋白的重组AAV.重组AAV表达的KDR具有与VEGF结合的活性,重组AAV感染人膀胱癌EJ细胞,皮下注射Balb-c裸鼠.Ⅷ因子免疫组化染色进行微血管密度测定.结果重组AAV感染人膀胱癌EJ细胞形成的肿瘤血管化程度明显低于对照组.结论重组AAV介导的KDR胞外区基因可有效的抑制裸鼠人膀胱癌组织的新生血管生成.
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