【摘 要】
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目的 探讨人胚胎发育过程中碱性成纤维细胞生长因子1(FGF1)对造血细胞形成的影响,研究FGF1、血管内皮生长因子受体(KDR)、CD133、CD34和转录凶子Ihh、SCL、GATA-1、GATA-2和P
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划);
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目的 探讨人胚胎发育过程中碱性成纤维细胞生长因子1(FGF1)对造血细胞形成的影响,研究FGF1、血管内皮生长因子受体(KDR)、CD133、CD34和转录凶子Ihh、SCL、GATA-1、GATA-2和PU.1在卵黄囊中的表达,了解FGF1、造血细胞和转录因子在胚胎造血过程中的作用和关系.方法 采用药物流产孕3～12周人胚胎,冰冻切片,免疫组织化学SP染色,并应用分析软件进行分析,同时进行造血相关转录因子RT-PCR扩增分析.结果 孕3～12周人胚卵黄囊血岛均由外周的血管内皮细胞和中心的造血细胞组成.在16 d的卵黄囊中脏壁中胚层嗣血岛周边表达FGF1阳性产物,而血岛内少有FGF1表达,低表达KDR,不表达CD34、CD133;21 d上述抗体均有表达,灰度值减少,染色增强;30d时在血岛和中胚层发现强染色CD34+、CD133+和KDR+细胞,灰度值分别由156±16、173±18和160±14降低为53±7、52±6和69±8;FGF1呈强阳性表达,灰度值由161±13急降至40±5,达到最低值.有些阳性细胞沿血岛边缘形成血管样结构.45 d时中等程度表达CD34、CD133、KDR细胞数量增多,细胞聚集成团分布于血岛中;FGF1阳性细胞也多聚集分布在血岛中,中胚层少有分布,灰度值增加.7周后CD133+、KDR+、CD34+细胞明显减少,灰度值增加,染色变浅,卵黄囊弱表达FGF1,灰度值增加为179±22.RT-PCR结果显示,不同时间的卵黄囊均表达Ihh、SCL、GATA-1和GATA-2,PU.1在16 d不表达,此后表达.结论 卵黄囊造血细胞的发育受FGF1和转录因子的诱导和调节,提示FGF1介导的信号通路对造血中胚层模式的形成、成血管血液干细胞的扩增以及造血十细胞的动态平衡具有重要意义.FGF通路可能通过调节GATA1等转录因子表达水平和活性来调控卵黄囊造血.
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