【摘 要】
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取含有卡那霉素抗性(KanR)基因的自杀性质粒pJP5603和含vpr全长基因的pUC19phiΦRID质粒,分别采用粘性末端及平末端两种连接法.2种质粒Hinc Ⅱ单酶切后进行平末端连接,经鉴定
【机 构】
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上海交通大学动物科学系,南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室
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取含有卡那霉素抗性(KanR)基因的自杀性质粒pJP5603和含vpr全长基因的pUC19phiΦRID质粒,分别采用粘性末端及平末端两种连接法.2种质粒Hinc Ⅱ单酶切后进行平末端连接,经鉴定未得到重组质粒.pJP5603用Hinc Ⅱ和Xma I消化,回收3kb的载体质粒,pUC19ΦRID用Hinc Ⅱ和Age Ⅰ消化,回收778 bp vpr目的基因.通过粘性末端连接,转化到感受态细菌CC118λpir,利用KanR进行筛选,获得的克隆经Acc Ⅰ酶切鉴定和PCR检测,确定得到重组质粒,即pYY
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