【摘 要】
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目的 建立从少量外周血中提取白细胞线粒体DNA(mtDNA)的快速、简便方法。方法 5 8份抗凝血静置后取白细胞层 ,采用碱变性法裂解细胞 ,酚 氯仿 异戊醇抽提 ,RNA酶消化后
【机 构】
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第三军医大学新桥医院肿瘤科; 全军肿瘤诊治中心; 重庆市肿瘤生物技术研究所; 第三军医大学新桥医院病理科; 第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目 ( 30 0 80 0 30 ) ;全军医学科学技术研究“十五”计划基金重点课题 ( 0 1Z0 75) ;第三军医大学校管课题 ( 2 0 0 1)~~
论文部分内容阅读
目的 建立从少量外周血中提取白细胞线粒体DNA(mtDNA)的快速、简便方法。方法 5 8份抗凝血静置后取白细胞层 ,采用碱变性法裂解细胞 ,酚 氯仿 异戊醇抽提 ,RNA酶消化后再抽提及沉淀 ,PCR扩增产物电泳鉴定。结果 获得的mtDNA样品不存在蛋白质等污染 ,用特异性mtDNAPCR引物从 5 8例核酸样品中均能扩增出 15 2 8bp的mtDNA基因片段。结论 改良一步法是一种省时、经济、实用、重复性好、能满足常规分子生物学和遗传学分析需要的mtDNA制备新方法
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