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目的：构建组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）真核表达载体，并检测其在乳癌细胞系MCF-7中的瞬时表达。方法：以含t-PA cDNA的质粒PETPFR为模板，PCR扩增目的片段t-PA，HindⅢ和SalsⅠ双酶切t-PA，HindⅢ和XhoⅠ双酶切pcDNA3真核表达载体。SalⅠ和XhoⅠ的黏性末端互补，体外连接酶切产物，重组体转化感受态JM109细菌，筛选菌落和测序鉴定。以脂质转染胺试剂Lipofectamine^TM 2000将pcDNA3-t-PA转染入乳癌细胞系MCF-7，G418筛选。应用原位杂