【摘 要】
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目的:探讨健脾解毒方对β-catenin通路下游Runt相关转录因子2(RUNX2)和整合素β样因子1(ITGBL1)表达的影响,进一步揭示其抑制结直肠癌侵袭转移的作用机制.方法:①将LoVo细胞
【机 构】
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上海中医药大学附属曙光医院肿瘤科 上海201203;上海中医药大学附属曙光医院肿瘤研究所 上海201203;上海中医药大学中西医结合研究院 上海201203
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目的:探讨健脾解毒方对β-catenin通路下游Runt相关转录因子2(RUNX2)和整合素β样因子1(ITGBL1)表达的影响,进一步揭示其抑制结直肠癌侵袭转移的作用机制.方法:①将LoVo细胞分为健脾解毒方不同浓度(0、50、100、200 μg/ml)组,各组分别予以相应浓度的醇提物溶液.干预48 h后,PCR检测RUNX2、ITGBL1的mRNA表达,Western blot检测RUNX2、ITGBL1的蛋白表达.②构建慢病毒载体介导的RUNX2基因沉默LoVo细胞.将转染细胞分为对照组(shRNA/NC)、健脾解毒方(中药)组(shRNA/NC+200 μg/ml健脾解毒方醇提物)、RUNX2基因沉默组(shRNA/RUNX2)、RUNX2基因沉默+中药组(shRNA/RUNX2+200 μg/ml健脾解毒方醇提物),各组分别予以相应药物干预.细胞培养48 h后,Transwell实验观察细胞迁移情况,PCR检测ITGBL1的mRNA表达,Western blot检测ITGBL1的蛋白表达.结果:①健脾解毒方能够明显抑制β-catenin信号通路下游分子RUNX2、rTGBL1的mRNA和蛋白表达,且呈一定的剂量依赖性.②RUNX2基因沉默可抑制LoVo细胞迁移,与对照组相比,迁移细胞数和ITGBL1表达显著降低(P＜0.01).但RUNX2基因沉默+健脾解毒方组与RUNX2基因沉默组比较,迁移细胞数和ITGBL1表达无明显差异(P＞0.05).结论:RUNX2是健脾解毒方抑制结直肠癌细胞转移的关键靶点,健脾解毒方通过抑制RUNX2,下调ITGBL1表达,进而发挥抗结直肠癌侵袭转移的作用.
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