【摘 要】
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目的 测定广州部分地区造血干细胞移植术后人巨细胞病毒(HCMV)临床分离株对更昔洛韦(GCV)的敏感性,并初步建立实验室药物诱导HCMV耐药株.方法 收集造血干细胞移植术后发生HCM
【机 构】
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中山大学附属一院,广东广州,510080;中山大学附属二院
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目的 测定广州部分地区造血干细胞移植术后人巨细胞病毒(HCMV)临床分离株对更昔洛韦(GCV)的敏感性,并初步建立实验室药物诱导HCMV耐药株.方法 收集造血干细胞移植术后发生HCMV感染而接受GCV治疗的患者血液或尿液标本,采用HELF细胞培养法分离并鉴定HCMV临床株,50％终点法测定各临床毒株的感染性滴度TCID50,MTT法测定各毒株对更昔洛韦的敏感性(IC50).将HCMV AD169株在含有不同浓度(1.5～300μmol/L)的GCV中作连续传代培养,分别在病毒与1.5、3、6、10、50、300μmol/L浓度GCV培养后测定其IC50.结果 成功分离8株HCMV临床株,经培养后测定其TCID50分别为:10-4 12/0.1 mL、10-4 29/0.1mL、10-4.30/0.1mL、10-4.40/0.1mL、10-4.42/0.1mL、10-4.50/0.1mL、10-4.52/0.1mL、10-4.62/0.1mL；8株临床HCMV分离株对GCV的半数病毒抑制浓度IC50分别为1.89～ 5.95 μmol/L.GCV诱导HCMV实验株发现,培养液中GCV浓度增至10 μmol/L时,病毒开始出现耐药,IC50为18.15 μmol/L,当GCV浓度达到300 μmol/L时,300 μmol/L诱导培养的病毒对GCV的IC50则高达327.10μmol/L,为标准株HCMVAD169(IC50=1.88μmoL/L)的174倍.结论 该实验HCMV临床分离株对更昔洛韦敏感性均较高,未发现临床耐药株；通过体外药物诱导,初步构建HCMV耐药株,为HCMV的耐药研究创造条件.
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