【摘 要】
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目的:探索Toll样受体3(Toll-like receptor 3,TLR3)在调节大鼠胰岛β细胞株INS-1细胞生长中的作用及其相关机制。方法:采用1%牛血清白蛋白(BSA)代替血清培养12 h使INS-1细胞
【机 构】
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南京医科大学生物化学与分子生物学系,南京医科大学基础医学实验教学中心,
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目的:探索Toll样受体3(Toll-like receptor 3,TLR3)在调节大鼠胰岛β细胞株INS-1细胞生长中的作用及其相关机制。方法:采用1%牛血清白蛋白(BSA)代替血清培养12 h使INS-1细胞同步化处于G0期。TLR3的特异性激动剂聚肌胞(polyinosinic-polycytidylic acid,PIC)激活TLR3,26S蛋白酶体抑制剂MG132抑制蛋白酶体活性。MTT法检测细胞活力,流式细胞术测定细胞周期,实时定量RT-PCR、免疫印迹(Western blot)法检测细胞周期相关蛋白Cyclin D1的表达。结果:和对照组相比,PIC呈剂量依赖性抑制INS-1细胞生长活力(P<0.05);PIC能显著阻滞INS-1细胞周期于G1期(P<0.05);PIC处理组Cy-clin D1的mRNA水平无明显变化(P>0.05),但其蛋白水平显著下调(P<0.05);给予蛋白酶体抑制剂MG132预处理能缓解此下调作用。结论:激活的TLR3可能通过蛋白酶体介导的Cyclin D1降解,导致胰岛β细胞G1期阻滞,从而抑制其增殖,参与机体胰岛β细胞整体功能障碍的调节。
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