耐热菌的竞争定量PCR检测方法优化与建立

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【目的】 研究苹果浓缩汁中耐热菌(Alicyclobacillus acidoterrestris)的定量PCR快速检测法。【方法】 通过引物设计、PCR扩增及凝胶纯化试剂盒回收,构建并获得耐热菌的PCR竞争模板;用获得的竞争模板作为定量内标物建立耐热菌的竞争定量PCR(QC-PCR)检测体系。【结果】 经对建立的QC-PCR检测体系优化,目标模板检测灵敏度由5×10^4个分子/PCR体系,提高到50个分子/PCR体系,竞争模板和目标模板分子共扩增可检测到5×10^2个目标模板分子/P
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