慢病毒介导miR-499a-3p抑制序列在人脐静脉内皮细胞中的表达及对细胞增殖的影响

来源 :广西医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yyll2008
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目的:研究miR-499a-3p低表达对人脐静脉内皮细胞(HUEVC)增殖的影响。方法:利用RNA干扰技术构建携带has-miR-499a-3p抑制序列的慢病毒载体,在293T细胞中包装并测滴度。用敲低miR-499a-3p的病毒(下调组)及空载病毒(空载组)分别转染HUEVC,未转染的HUEVC为空白对照组。用RT-PCR法检测各组HUEVC中miR-499a-3p及其下游靶基因ADAM10的表达,CCK-8法检测HUEVC的增殖能力。结果:慢病毒载体构建成功,下调组病毒滴度为1×10~9 TU/mL。与空白对照组相比,下调组miR-499a-3p表达水平明显降低,ADAM10表达水平明显升高,HUEVC的增殖能力明显提高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:慢病毒介导miR-499a-3p表达抑制的HUEVC稳转细胞株构建成功,miR-499a-3p表达下调可促进HUEVC的增殖。
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