【摘 要】
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目的 探讨人乳头状瘤病毒18型E6蛋白(HPV18E6)与信号转导和转录激活因子1(STAT1)、蛋白激酶R(PKR)/真核细胞翻译启始因子2α(eIF2α)、核因子-κBp65(NF-κBp65)、丝裂酶原激
【机 构】
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天津市第一中心医院妇产科,天津医科大学总医院妇产科,天津医科大学基础医学院细胞形态学教研室
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目的 探讨人乳头状瘤病毒18型E6蛋白(HPV18E6)与信号转导和转录激活因子1(STAT1)、蛋白激酶R(PKR)/真核细胞翻译启始因子2α(eIF2α)、核因子-κBp65(NF-κBp65)、丝裂酶原激活的蛋白激酶(MAPK)/cJun氨基末端激酶(JNK)信号转导的关系以及可能的分子机制.方法 构建靶向HPV18E6癌基因及无关序列(NC序列)的短发夹结构RNA(shRNA)干扰序列的慢病毒载体(HPV18E6-RNAi-LV,NC-GFP-LV),转染宫颈癌HeLa细胞,在沉默HPV18E6癌基因表达的基础上,以RT-PCR、Western blot法分别在核酸、蛋白水平(包括磷酸化型)检测各组HPV18E6、STAT1、PKR、eIF2α、NF-κBp65、MAPK、JNK的表达,以transwell侵袭试验及MTT法检测各组HeLa细胞侵袭能力及对卡铂敏感性的差异.结果 HPV18E6癌基因的表达水平能影响NF-κBp65、PKR基因的核酸及蛋白表达水平,并影响磷酸化蛋白p-STAT1、p-PKR、p-eIF2α的磷酸化水平;HPV18E6-RNAi-LV转染组细胞侵袭抑制率及对卡铂的敏感程度明显高于其他组(P＜0.05或P＜0.01).结论 HPV18E6通过降低PKR表达,并使p-STAT1、p-PKR、p-eIF2α去磷酸化的方式抑制PKR/eIF2α信号传导通路激活,维持HeLa细胞增殖活性及侵袭能力,也可抑制凋亡.HPV18E6与MAPK/JNK信号转导关系尚不明确.
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