目的了解人表皮角质细胞培养过程中,氨对细胞生长和代谢的影响。方法收集3～6岁健康幼儿包皮,以DispaseⅡ分离、收集原代细胞,角质化细胞专用无血清培养基(Keratinocyte-SFM)培养。待细胞培养至第4代,更换含不同氨浓度的培养基,考察细胞生长和代谢的变化。结果氨抑制了细胞的生长,当氨的浓度为9.23mmol/L时,脉冲培养结束时的活细胞密度(0.84×105个/ml)进一步下降,细胞存活率下降至54.5%;氨对细胞生长的抑制作用遵循二级抑制模型,其模型常数Ka为4.46(mmol/L)2,即当氨的浓度为2.11mmol/L时,细胞的比生长速率下降到最大比生长速率的50%。当氨浓度从1.23mmol/L增加到1.73mmol/L,细胞对葡萄糖的得率系数下降了48.0%,葡萄糖的比消耗速率上升了14.8%;与氨浓度为1.23mmol/L相比,9.23mmol/L的氨使乳酸对葡萄糖的得率系数增加了12.0%,乳酸的比生成速率增加了53.3%。氨浓度的增加明显改变了细胞的代谢,促进了细胞对葡萄糖的利用,消耗的葡萄糖更倾向于乳酸的生成。当氨浓度为9.23mmol/L,谷氨酰胺的比消耗速率和氨的比生成速率分别是氨浓度为1.23mmol/L的20.2%和6.2%。氨抑制了谷氨酰胺的消耗,谷氨酰胺在生成谷氨酸后经过脱氢途径的流量减少,更多地向转氨途径,即低效率的产能途径偏移。结论在人表皮角质细胞的培养过程中,应尽量减少氨的积累。